Молочнокислые бактерии: молочнокислые стрептококки(мезофильные,термофильные,ароматообразующие)
Активностъ свертывания и органолептические свойствa выделенных штаммов являются наиболее важными и решающими показателями,определяющими пригодность их для использования в производстве. Кроме того, мезофильные молочнокислые стрептококки оценивают по следующим тестам: резистентность к бактериофагу, рост в лакмусовом молоке при температуре 45°С, образование аммиака из аргинина, образование диацетила, ацетоина и углекислого газа (для ароматобразующих стрептококков), способность к подавлению термоустойчивой молочнокислой палочки.
Содержание работы1.История открытия молочнокислых бактерий.2.Общая характеристика молочнокислых бактерий.2.1.Морфология клеток.2.2.Размножение.2.3.Форма колоний.2.4.Культуральные признаки.2.6.Виды.2.7.Практическое применение.3.Молочнокислые стрептококки.4.Мезофильные молочнокислые стрептококки.5.Термофильные молочнокислые стрептококки.6.Ароматообразные стрептококки.Список использованной литературы.
Файлы: 1 файлмикраааааааа.doc
МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСкой федерации.
Волгоградский государственный аграрный университет.
Кафедра:инфекционная патология и судебная ветеринарная медицина.
по санитарной микробиологии.
На тему : << Молочнокислые бактерии : молочнокислые стрептококки(мезофильные, термофильные, ароматообразующие).>>
студент 3 курса группы ВС-31.
Факультета биотехнологий и ветеринарной медицины.
Направления :Ветеринарно-санитарная экспертиза.
Проверил :Шинкаренко А.С.
1.История открытия молочнокислых бактерий.
2.Общая характеристика молочнокислых бактерий.
4.Мезофильные молочнокислые стрептококки.
5.Термофильные молочнокислые стрептококки.
Список использованной литературы.
Приготовление кисломолочных продуктов было известно с давних времен.
Раньше кисломолочные продукты готовились путем естественной закваски и самоквасом. Сейчас для приготовления большинства продуктов используется только чистые молочнокислые микроорганизмы.
1.История открытия молочнокислых бактерий.
Бактерии – это очень древние организмы, занявшие все среды обитания. Но открыты они были сравнительно недавно, в XVII в.
Первым человеком, увидевшим микроорганизмы, был голландец Антонио ван Левенгук. Заинтересовавшись строением льняного волокна, он отшлифовал для себя несколько грубых линз. Поместил их в оправы из серебра. Таким образом, появилась первая лупа. С помощью такой лупы Левенгук впервые увидел бактерий. Так зародилась наука – микробиология.(Гусев М. В., 2003.)
Первым, кто увидел микрофлору кисломолочных продуктов, был француз Луи Пастер. Исследуя под микроскопом кислое молоко, Пастер обнаружил в нем очень маленькие "шарики" и "палочки". Наблюдая за ними, Пастер убедился в том, что «шарики и палочки» в кислом молоке растут, и количество их быстро увеличивается. "Следовательно, они размножаются", - решил Пастер. Добавляя ничтожное количество кислого молока, содержащего «шарики и палочки», в свежее молоко, Пастер вызывал его сквашивание, то есть молочнокислое брожение. Эти исследования вызвали большой интерес к этой теме. Усилиями ученых микробиологов были изучены как физиология самих микроорганизмов, так и биохимические процессы брожения и гниения, вызываемые бактериями. Нормальными обитателями даже хорошего молока считаются кисломолочные бактерии, дрожжи. В теплом молоке бактерии очень быстро размножаются: каждые полчаса может разделиться пополам и дать две новые. Таким образом, в течение короткого времени количество бактерий в 1мм теплого молока может достигнуть нескольких миллионов, что отразится на его качестве - оно скиснет, если в нем преобладают молочнокислые бактерии, или приобретет неприятный вкус в случае развития нежелательных бактерий, например пептонизирующих.(Асонов Н.Р.2007.)
2.Общая характеристика молочнокислых бактерий.
Молочнокислые бактерии -группа микроаэрофильных грамположительных микроорганизмов ,сбраживающих углеводы с образованием молочной кислоты ,как одного из основных продуктов.
Основным свойством молочнокислых бактерий, по которому их объединяют в отдельную обширную группу микроорганизмов, является способность образовывать в качестве главного продукта брожения молочную кислоту. Сбраживание углеводов по типу молочнокислого брожения, как правило, коррелирует с рядом других признаков. Молочнокислые бактерии неподвижны, не образуют спор, каталазо негативны, положительно окрашиваются по Граму, не образуют пигмент, не восстанавливают нитраты в нитриты.(Колычев Н.М. 2009. )
В последние годы были описаны штаммы, которые по некоторым свойствам отличаются от типичных. Они подвижны, восстанавливают нитраты в нитриты, образуют споры, каталазоположительны.
Молочнокислые бактерии - палочки, реже шаровидные формы, все они грамположительные. Размеры которых зависят от состава среды и условий культивирования.
Палочковидные формы могут быть короткими, почти коккообразными, длиной 0,5—0,7 мкм и длинными нитевидными, иногда достигающими длины 8,0 мкм. Располагаются они единично, парами или цепочками, некоторые с характерными «обрубленными» концами. (Колычев Н.М. 2009.)
Кокковые формы молочнокислых бактерий бывают овальными, диаметр клеток от 0,5—0,6 до 1 мкм. Они располагаются единично, парами или цепочками различной длины ( рис.36.)
На форму клеток значительное влияние оказывает состав среды. Так, длина клеток молочнокислых бактерий увеличивается в средах с высоким содержанием этилового спирта . Этиловый спирт тормозит деление клеток сильнее, чем рост. Поэтому в спиртсодержащих средах палочки вытягиваются в длину, становятся тонкими, кокки сохраняют свою форму .
Молочнокислые бактерии неподвижны, не образуют спор, положительно окрашиваются по Граму, не образуют пигмент, не восстанавливают нитраты в нитриты, характеризуются неактивной каталазой.
Структура и компоненты клеток молочнокислых бактерий во многом сходны с другими грамположитель-ными бактериями.
Клеточная оболочка представляет собой электронноплотный гомогенный слой толщиной 15—60 нм. Цитоплазматическая мембрана может быть двухслойной или трехслойной толщиной до 7—8 нм .
В цитоплазме клеток обнаружены рибосомы диаметром до 15 нм, ядерный материал (нуклеоид), состоящий из тонких плотных нитей, отождествляемых с дезоксирибонуклеиновой кислотой (ДНК) (рис. 37, 38). Структура и состав клеток могут быть различными у молочнокислых бактерий отдельных видов. Некоторые палочковидные формы содержат в качестве включений зерна метахроматина.
2.2.Размножение молочночнокисл ых бактерий.
Молочнокислые бактерии размножаются делением перегородкой. Если клетки делятся в одной плоскости, это приводит к образованию цепочек; когда же деление идет в двух плоскостях, образуются так называемые тетрады, характерные для молочнокислых бактерий рода Pediococcus. Следует отметить интересные наблюдения Германа (Herrmann, 1966), который методом травления по замороженному срезу показал, что у педиококков группы, состоящие из двух, трех, или четырех клеток, имеют общую клеточную стенку. Тетрады образуются из единичной клетки путем деления ее в разных плоскостях, но не образуются вторично путем перераспределения клеток в цепочке.(Асонов Н.Р. ,2007.)
Отдельные исследователи нередко весьма противоречиво описывали форму колоний различных видов молочнокислых бактерий. Еще Орла-Иенсен (Orla-Jensen, 1919) утверждал, что истинные молочнокислые бактерии на желатиновых и агаризованных средах образуют мелкие колонии без выраженного поверхностного роста. С. А. Королев (1932) показал, что это утверждение неточно, так как все виды рода Streptococcusобразуют поверхностные колонии, хотя и мелкие.
По данным О. К. Палладиной (1941), прибавление в среду веществ, обладающих восстановительными свойствами, например, 0,2% цистеина, содействует образованию у молочнокислых палочковидных бактерий типичных поверхностных шероховатых форм колоний.
Молочнокислые бактерии размножаются путем простого деления. Бактериальная клетка увеличивается в размерах и делится на две одинаковых клетки. Деление клетки в одной плоскости приводит к образованию цепочек, в двух плоскостях — к образованию тетрад, характерных для рода Pediococcus. При благоприятных условиях некоторые бактерии дают новое поколение через 15 мин и менее, при неблагоприятных — через 24 ч и более.
На поверхности желатиновых, агаризованных сред молочнокислые бактерии образуют мелкие колонии, иногда без выраженного поверхностного роста. По данным О. К. Палладиной палочковидные бактерии на средах, содержащих вещества с восстановительными свойствами, например с 0,2% цистеина, образуют типичные шероховатые формы колоний. У бактерий рода Leuconostoc найдены S-, О- и R-типы колоний.
2.4.Культуральные признаки молочнокислых бактерий.
В жидкой среде в первые двое суток вызывают интенсивное равномерное помутнение. Если в среду добавлен мел, то наблюдается выделение пузырьков углекислого газа. Клетки бактерий находятся во взвешенном состоянии благодаря конвекционным токам, возникающим в результате выделения продуктов реакции. По окончании про округлые колонии с гладкой поверхностью (S-тип), слегка выпуклые сероватого цвета. Встречаются колонии звездчатой формы, шероховатые( R-тип).Описаны также единичные случаи образования слизистых колоний (О-тип). По размеру колоний молочнокислые палочки бывают мелкие (диаметр менее 2 мм), средние (2-4 мм) и крупные (более 4 мм в диаметре).
Молочнокислые палочки являются факультативными (условными) анаэробами, так как лучше растут без доступа воздуха. При глубинном посеве на твердую питательную среду образуются плотные колонии в виде правильных линз (чечевицеобразные) треугольной и неправильной формы или нежные, напоминающие снежинку или комочек ваты. Вокруг колоний образуется зона растворения мела. Хороший рост наблюдается в полужидкой питательной среде, содержащей 0,15-0,75% агара. Небольшие концентрации агара обеспечивают низкий окислительно-восстановительный потенциал среды и создают микроаэрофильные условия. По характеру роста в полужидкой среде М. Тоом, А. Ленцнер, М. Воронина, М. Микельсаар выделили пять вариантов: рост шариками, в виде продольной полосатости, придонный, поверхностный и равномерное помутнение среды.
Температурный диапазон жизнедеятельности лактобактерий широк : температура для них является 10 градусов Цельсия . Для термофильных видов оптимальная температура колеблется в пределах 38-45 градусов , а минимальная -20-22 градуса Цельсия.(Асонов Н.Р.,2007.)
Наиболее важными в техническом отношении из молочнокислых бактерий являются:
1. Молочнокислый стрептококк ( Streptococcus lactis) , относится к гомоферментативным молочнокислым бактериям, находится почти во всех молочных продуктах, является основной частью микрофлоры простокваш.
2. Сливочный стрептококк (Str. Cremoris) представляет собой длинные цепочки сферических клеток.
К гетероферментативным молочнокислым бактериям относятся молочнокислые стрептококки.
3.Ароматобразующие ( Str. Citrovorus, Str. Diacetilactis) придают кисломолочным продуктам приятные вкус и аромат.
4.Ацидофильная палочка (Lactobact. Acidophilus) термофильная бактерия.
2.7.Два основных рода молочнок ислых бактерий.
1. Род Streptococcus вид Streptococcus Lactis — это кокки овальной формы 0.8-1.2 мкм, которые образуют цепочки различной длины. При старении цепочка дробится.
Вид Streptococcus diacetilactis — это более мелкие кокки, диаметр которых 0.5-0.7 мкм. Они образуют цепочки различной длины, продукты жизнедеятельности которых придают аромат продукту.
2. Род Lactobacillus — представляет собой палочковидные клетки:6- 8 мкм длиной, образующие короткие цепочки. Неспорообразующие.
Наиболее широко распространены:
2.8.Практическое использование молочнокислых бактерий.
Молочнокислые бактерии используют в процессе приготовления ряда молочных продуктов. При помощи молочнокислого брожения получают творог, сметану, простоквашу, кефир, кумыс, ацидофильное молоко, различные сыры, кислосливочное масло и другие продукты. Изготовляют эти продукты на специальных заквасках, содержащих чистые культуры молочнокислых бактерий, которые применяют в молочном деле с 1888 г. (сначала для изготовления масла, а затем и других продуктов).
Для получения многих кисломолочных продуктов, в том числе и сыров, используют гомоферментативные мезофильные и термофильные молочнокислые бактерии.
Молочнокислое брожение крайне необходимо в хлебопечении при изготовлении ржаного хлеба и в производстве жидких дрожжей.
При помощи некоторых штаммов молочнокислых бактерий получают молочную кислоту. Для этой цели активными штаммами Thermobacterium cereale сбраживают мелассу, рафинадную патоку, товарный сахар и крахмал (картофельный и кукурузный), предварительно осахаренный, а культурами Lactobact. bulgaricum или Streptococcus lactis — молочную сыворотку.
Молочная кислота, получаемая брожением, широко применяется в народном хозяйстве. Молочной кислотой подкисляют фруктовые соки и эссенции, лимонады, маринады, сиропы. Ее используют при изготовлении консервов мясных, рыбных и растительных.
Молочная кислота используется и в медицине. Кроме того, соль ее — лактат меди — применяется при новейших способах гальванопластики, а соли сурьмы и натрия — в текстильной промышленности. Нерастворимые в воде эфиры молочной кислоты незаменимы в производстве пластмасс, лаков, чернил и др.
Молочнокислый стрептококк - соединенные попарно или в короткие цепочки шаровидные бактерии. Лучше всего развиваются при температуре 30-35°С, их температурный минимум около 10°С. При брожении накапливают до 1% кислоты.
К молочнокислым стрептококкам относят мезофильные стрептококки Streptococcus lactis, Str. cremoris и ароматобразующие Str. diacetilactis, Str. acetoinicus, Str. paracitrovorus (Leuconostoc citrovorum), Str. citrovorus (Leuconostoc citrovorum ); термофильные Str. thermophilus; энтерококки (молочнокислые стрептококки кишечного происхождения) Str. liquefaciens, Str. faecalis, Str. zymogenes, Str. faecium, Str. durans, Str. bovis.
Это грамположительные кокки (рис. 27), образующие короткие или длинные цепочки. Неподвижны, спор и капсул не образуют. Они относятся к факультативно-анаэробным микроорганизмам (микроаэрофилам). Большинство из них не обладают протеолитической активностью, не образуют каталазу. Вызывают расщепление углеводов гомо- или гетероферментативным путем (такое деление связано с количеством получаемых при молочнокислом брожении побочных продуктов — летучих кислот, эфиров, спирта, диацетила и пр.).
По отношению к температуре молочнокислые стрептококки делят на мезофильные и термофильные. Клетки в молоке часто бывают расположены в виде довольно длинных цепочек. Некоторые культуры сливочного стрептококка образуют в молоке сгустки сметанообразной консистенции. Сливочный стрептококк более чувствителен, чем молочный, к неблагоприятным условиям — он хуже развивается в весеннее время, а также в молоке, подвергнутом высокотемпературной обработке. Применяют сливочный стрептококк при производстве сметаны, творога, масла, сыров с низкой температурой второго нагревания.